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| 內容簡介： |
实时荧光定量PCR技术简称Real-time
PCR具有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点，受到生物学家们的青睐，促进了生命科学的发展。该技术是目前确定样品中DNA或RNA拷贝数最敏感、最准确的方法，还可进行多重反应，无污染，自动化程度高，在生物学的所有学科、医学基础和药学等领域得到广泛应用。
本书在介绍实时荧光定量PCR技术原理基础上，集中论述该技术在各个领域中的应用，包括检测致病菌、检测病毒、检测基因突变和临床、遗传病研究、肿瘤研究、环境微生物检测、动物学研究、基因表达检测和流行病学等。在编写时力求方法尽可能详细，对每一种方法提供了反应体系、反应条件和结果分析，还附有参考文献，但读者在具体应用时，也不宜照本宣科，在实验过程中应因事制宜，对实验条件进行必要的优化。
本书可供分子生物学、细胞生物学等生物学科，医学基础、药学等学科高年级本科生、研究生以及其他研究人员阅读参考。
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| 目錄：
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第一章 实时荧光定量PCR概述
第一节 实时荧光定量PCR的基本原理
一、引言
二、原理
第二节 实时荧光定量PCR仪
一、Applied Biosystems公司的系列实时荧光定量PCR仪
二、iQTM 5实时荧光定量PCR仪
三、LightCycler实时荧光定量PCR仪
四、SmartCycler System实时荧光定量PCR仪
五、Mx3000P实时荧光定量PCR仪
六、Rotor?Gene实时荧光定量PCR仪
第三节 实时荧光定量PCR中的荧光化学物质
一、荧光染料
二、水解探针
三、分子信标
四、荧光标记引物
五、双探针杂交
六、复合探针
第四节 实时荧光定量PCR的定量方法
一、绝对定量
二、相对定量
第五节 实时荧光定量PCR的实验方法
一、以DNA为起始实验材料进行实时荧光定量PCR反应
二、以RNA为起始实验材料进行实时荧光定量RT?PCR
第六节 实时荧光定量PCR实验中应注意的问题
一、扩增子的设计
二、实验方案的优化
三、实践中应该注意的问题
小结
本章参考文献
第二章 实时荧光定量PCR在病原菌检测中的应用
第一节 沙门菌的检测
一、引言
二、材料
三、方法
四、注意事项
五、应用
六、小结
本节参考文献
第二节 在幽门螺杆菌检测中的应用
一、引言
二、基本原理
三、试验材料
四、方法
五、注意事项
六、应用
七、小结
本节参考文献
第三节 在致病性大肠杆菌检测中的应用
一、检测DNA样品中fliCH7基因的Ｒeal?time PCR方法
二、检测RNA样品中rfbE和eae基因的Real?time PCR方法
本节参考文献
第四节 在肉毒梭菌检测中的应用
方案一SYBR Green Ⅰ Real?time PCR方法检测A型肉毒梭菌
一、引言
二、原理
三、实验目的
四、实验材料和方法
五、实验结果
六、讨论
方案二用TaqMan Real?time PCR对A型、B型和E型肉毒梭菌的检测
一、引言
二、原理
三、实验目的
四、实验材料和方法
五、实验结果
六、讨论
方案三TaqMan Real?time PCR 在肉毒梭菌C型毒素基因检测中的应用
一、引言
二、原理
三、实验目的
四、实验材料和方法
五、实验结果
六、讨论
本节参考文献
第五节 在嗜水气单胞菌检测中的应用
一、引言
二、材料
三、方法
四、应用
本节参考文献
小结
第三章 实时荧光定量PCR在病毒检测中的应用
第一节 实时荧光定量RT?PCR在甲型H1N1检测中的应用
一、引言
二、试验目的
三、材料与试剂
四、试验方法
五、结果判定
六、注意事项
七、小结
本节参考文献
第二节 登革病毒的实时荧光定量RT?PCR检测
一、引言
二、试验目的
三、材料与试剂
四、操作步骤
五、注意事项
本节参考文献
第三节 H5N1亚型高致病性禽流感病毒的实时荧光定量RT?PCR检测
一、引言
二、试验目的
三、材料与试剂
四、操作步骤
五、试验结果判定
六、注意事项
本节参考文献
第四节 肠道病毒71型的实时荧光定量RT?PCR检测
一、引言
二、试验目的
三、材料与试剂
四、操作步骤
五、结果分析
六、注意事项
本节参考文献
第五节 多重实时荧光定量PCR在呼吸道病毒检测中的应用
一、引言
二、试验目的
三、材料与试剂
四、试验原理与方法
五、结果判定
六、注意事项
七、小结
本节参考文献
第六节 实时荧光定量PCR用于重组杆状病毒滴度检测的研究
一、引言
二、试验目的
三、材料
四、方法
五、结果及分析
六、注意事项
七、小结
本节参考文献
第七节 实时荧光定量PCR在HIV检测中的应用
一、引言
二、基本原理
三、试验材料
四、方法
五、试验结果判定
六、注意事项
七、应用
本节参考文献
第八节 在检测HBV和HCV方面的应用
A? 实时荧光定量PCR在检测HBV方面的应用
一、引言
二、材料和方法
三、小结
B?实时荧光定量PCR在检测HCV方面的应用
一、引言
二、材料和方法
三、小结
本节参考文献
第四章 实时荧光定量PCR检测基因突变及临床应用
第一节 实时荧光定量PCR检测基因突变在遗传病诊断中的应用
一、引言
二、应用巢式PCR和TaqMan MGB探针Real?time PCR技术检测经典型苯丙酮
尿症（PKU）
三、应用SYBR Green Ⅰ Real?time PCR技术检测慢性骨髓增殖性疾病
第二节 实时荧光定量PCR检测基因突变在肿瘤诊断、治疗和预后中的应用
一、引言
二、应用ASB?PCR方法检测Kras基因突变
第三节 实时荧光定量PCR检测基因突变在耐药病原体监测中的应用
一、引言
二、通过杂交探针实时荧光定量PCR检测临床分离的结核分枝杆菌的异烟肼抗性
三、FRET实时荧光定量PCR快速准确检测幽门螺杆菌耐克拉霉素相关的基因点
突变
本章参考文献
第五章 实时荧光定量PCR在遗传病研究中的应用
第一节 实时荧光定量PCR识别SNP的方法
一、原理
二、常用的突变识别方法
本节参考文献
第二节 实时荧光定量PCR在SNP分型中的应用
一、引言
二、试验目的
三、试验原理
四、试验材料
五、试验方法
六、结果与讨论
本节参考文献
第三节 等位基因特异性实时荧光定量PCR在DNA库中等位基因定量检测中的
应用
一、引言
二、试验目的
三、试验原理
四、试验材料
五、实验方法
六、结果与讨论
本节参考文献
第四节 等位基因特异性PCR结合分子信标实时荧光定量PCR在肿瘤和线粒体疾
病检测中的应用
一、引言
二、试验目的
三、试验原理
四、试验材料
五、试验方法
六、结果与讨论
本节参考文献
第六章 实时荧光定量PCR在肿瘤中的应用
第一节 实时荧光定量PCR在肿瘤早期诊断中的意义
方案1Pescadillo在乳腺癌组织中的表达及其临床意义
一、试验目的
二、基本原理
三、实验材料
四、实验方法
五、实验结果
六、小结
方案2实时荧光定量PCR检测microRNA在不同肿瘤细胞中的表达
一、实验目的
二、基本原理
三、材料
四、方法
五、结果
六、小结
第二节 实时荧光定量PCR在肿瘤预后评估中的应用
方案1实时荧光定量PCR检测uPA、PAI?1、TIMP?1 mRNA表达与乳腺癌预
后的关系
一、实验目的
二、实验材料
三、实验方法
四、实验结果
五、小结
方案2实时荧光定量PCR检测uPA mRNA表达在HER2阳性乳腺癌预后中的
意义
一、实验目的
二、实验材料
三、实验方法
四、实验结果
五、小结
第三节 实时荧光定量PCR在药物疗效判断中的作用
一、实验目的
二、材料
三、方法
四、结果
五、小结
第四节 实时荧光定量PCR在基因表达调控中的应用
一、实验目的
二、实验材料
三、实验方法
四、实验结果
五、小结
本章参考文献
第七章 实时荧光定量PCR在环境微生物检测中的应用
第一节 实时荧光定量PCR在检测土壤微生物中的应用
一、引言
二、试验目的
三、原理
四、土壤微生物DNA提取方法汇总
五、操作步骤
六、实时荧光定量PCR在土壤中病原菌定量检测中的应用
七、实时荧光定量PCR在土壤中生防菌的动态变化监测中的应用
本节参考文献
第二节 实时荧光定量PCR 技术在空气微生物检测中的应用
一、引言
二、试验目的
三、试验材料与方法
四、小结
本节参考文献
第三节 实时荧光定量PCR在检测水源微生物方面的应用
一、引言
二、基本原理
三、研究进展
四、实验方法
五、实验结果
六、结果分析
本节参考文献
第八章 实时荧光定量PCR在动物学研究中的应用
第一节 实时荧光定量PCR在动物感染性疾病监测和检测中的应用
一、引言
二、原理
三、材料
四、方法与步骤
五、注意事项
六、应用
本节参考文献
第二节 实时荧光定量PCR在转基因动物检测中的应用
一、引言
二、原理
三、材料
四、方法与步骤
五、注意事项
六、应用
本节参考文献
第三节 实时荧光定量PCR在突变动物检测和突变品系培育中的应用
一、引言
二、SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR在HLA?1502基因检测中的应用
三、实时荧光定量PCR在白化突变鼠检测中的应用
四、注意事项
五、应用
本节参考文献
第四节 实时荧光定量PCR在药物效果评价动物实验中的应用
一、引言
二、实时荧光定量PCR在马传染性贫血病毒疫苗效果评价中的应用
三、利用实时荧光定量PCR评价以离子交换色谱纯化抗体时外源病毒因子的清除效果
四、注意事项
五、应用
本节参考文献
第九章 实时荧光定量PCR在基因表达检测和流行病学中的应用
第一节 实时荧光定量PCR在分析基因差异表达中的应用
一、实时荧光定量PCR实验的设计和优化
二、实时荧光定量PCR应用实例
三、实验注意事项
四、小结
本节参考文献
第二节 实时荧光定量PCR检测CAR基因在小鼠肺发育不同阶段中的表达
一、引言
二、材料及方法
三、数据分析
本节参考文献
第三节 实时荧光定量PCR在流行病学中的应用
一、微生物的检测和鉴定
二、耐药分析
三、DNA甲基化、单核苷酸多态性及突变分析
四、肿瘤基因检测
五、基因表达差异分析
六、微生态中微生物种的相对定量
本节参考文献
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